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标题：Sulfo-Cy5 DBCO；三磺酸-CY5-二苯并环辛炔；Sulfo-Cyanine5 DBCO

一、化学试剂的基本信息

保存条件：避光、-20°C储存，避免反复冻融

英文名称： Sulfo-Cy5 DBCO

中文名称：磺酸基花菁5-二苯并环辛炔

CAS：1564286-24-3

分子式：C52H56N4O11S3

分子量：1009.2

性状：固体

颜色：Blue to black

Emission (Em)：668nm

Excitation (Ex)：647nm

溶解度：水、DMSO、DMF、DCM

规格标准：该试剂的纯度通常达到95%以上，规格包括1mg、5mg、10mg等，也可按需包装。

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生产商信息：陕西新研博美生物科技有限公司

二、基本定义

Sulfo-Cy5 DBCO is a water-soluble linker of Cyanine5 fluorophore.

DBCO group enables copper free biocompatible Click Chemistry with fast reaction kinetics and good stability.

This reagent is compatible to a wide range of standard fluorescent instrumentation such as imagers, plate readers, and microscopes.

Sulfo-Cy5 DBCO 是 Cyanine5 荧光团的水溶性连接子。

DBCO 组可实现无铜生物相容性点击化学，具有快速反应动力学和良好的稳定性。

该试剂与各种标准荧光仪器兼容，如成像仪、酶标仪和显微镜。

Sulfo-Cy5 DBCO 的作用机制基于两类核心功能：

荧光标记功能：

Sulfo-Cy5 部分的共轭双键系统可吸收特定波长的光（通常为近红外光），通过电子跃迁发射荧光（波长约 670 nm），适用于深层组织成像和高分辨率检测。

生物正交反应：

DBCO 基团与目标分子上的叠氮基团（-N₃）通过应变促进的炔-叠氮环加成（SPAAC）发生共价结合，形成稳定的三唑键。该反应无需铜催化剂，条件温和（中性或微碱性 pH，室温或 37°C 孵育 15–30 分钟），且具有高选择性和效率。

三、使用说明

（一）使用条件

反应环境：

pH：中性或微碱性（pH 7.2–8.5），常用磷酸盐缓冲液（如 20 mM PBS, pH 7.4）。

温度：室温（25°C）或 37°C。

避光：全程需避光操作，防止荧光猝灭。

浓度范围：

标记生物分子时，DBCO 试剂通常以 1–10 μM 的终浓度添加。

对于抗体标记，DBCO 试剂需以 20–30 倍摩尔过量使用。

溶剂与储存：

溶于水或 DMSO（二甲基亚砜），水溶液中溶解性良好。

储存条件：-20°C 避光防潮，避免反复冻干。

（二）实验步骤（以标记抗体或纳米颗粒为例）

预处理生物分子：

将待标记的抗体、蛋白质或纳米颗粒溶解于磷酸盐缓冲液（如 20 mM PBS, pH 7.4），浓度建议为 1–10 mg/mL。

添加 Sulfo-Cy5 DBCO：

将 Sulfo-Cy5 DBCO 以 DMSO 或水配制成储备液（如 10 mM），按需加入生物分子溶液中（终浓度 1–10 μM）。

轻微涡旋混匀，确保充分反应。

孵育反应：

在避光条件下，室温或 37°C 孵育 30 分钟至过夜（通常过夜以保障反应完全）。

纯化标记产物：

使用尺寸排阻色谱（如 PD-10 柱，填充 Sephadex G-25）去除未结合的染料：

先用缓冲液平衡柱子（10 mL PBS）。

上样反应混合物，用 4 mL 缓冲液洗脱，收集有色馏分（约 1 mL）。

也可通过透析或超滤法纯化。

验证与储存：

通过紫外-可见光谱测定标记产物的浓度（Cy5 最大吸收峰约 649 nm）。

纯化后的标记物需分装，-20°C 避光保存。

四、新研博美目录列表：

AT 647 NHS ester

AT 647 Tetrazine

AT 465 Azide

ATTO 390 NHS，ATTO 390 SE

ATTO 390 maleimide

ATTO 390 PEG2 azide

ATTO 488 NHS ester

Biotin-PEG8-NHS ester

Biotin-PEG12-NHS ester

diSulfo-ICG Maleimide

diSulfo-ICG Me-tetrazine

温馨提示：

试剂仅用于科研实验，不可用于人体~~~~~编辑作者：陕西新研博美生物科技有限公司木南

发布于：陕西省